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    我司點(diǎn)撥:拿到細(xì)胞如何處理?

    發(fā)布時間: 2021-01-05  點(diǎn)擊次數(shù): 1488次
    1.收到 細(xì)胞,di一時間要鏡檢:調(diào)查細(xì)胞形態(tài)是否正常,關(guān)于貼壁細(xì)胞則要留意看貼壁狀況是否很好,調(diào)查細(xì)胞密度,有疑議及時咨供給細(xì)胞的技術(shù)人員。由于運(yùn)送的時間或許溫度的改變,許多貼壁細(xì)胞在盛滿培育基的瓶子里成長的狀況平和時會有點(diǎn)不一樣,主要是貼壁結(jié)實(shí)問題。比如293T,平常貼壁就不是很牢,在裝滿的培育基瓶子里邊,會發(fā)生大片的脫落,細(xì)胞集合在一起,但是細(xì)胞成長還是正常的,經(jīng)過離心搜集,加以胰酶的消化,從頭打散,又能夠正常的貼壁成長。
     
    2.當(dāng)經(jīng)過上一步的調(diào)查,細(xì)胞初步?jīng)]有任何問題時,進(jìn)行下一步操作。當(dāng)收到的細(xì)胞密達(dá)到80%左右時,則處理如下:棄除瓶中大部分培育基,僅保留5到10mL培育所需的慣例培育基;或更換新鮮的培育基,置于培育箱中,隨后每天調(diào)查。細(xì)胞在低于正常成長溫度狀況下,會調(diào)整為停止期,或許慢速成長期,有必要康復(fù)37度的環(huán)境至少3個小時左右,才能從頭調(diào)整到接近對數(shù)成長期的狀況,在對數(shù)成長期進(jìn)行細(xì)胞的傳代會大大增加傳代的成功率,和細(xì)胞的存活率。
     
    3.如果經(jīng)di一步調(diào)查發(fā)現(xiàn)細(xì)胞密度超越90%,而且 細(xì)胞 狀況很好時,則復(fù)溫后2個小時需求立即傳代。傳代的比例應(yīng)依據(jù)不同的細(xì)胞而定。關(guān)于成長比較快,狀況安穩(wěn),不易受外界影響的細(xì)胞能夠一次多傳幾瓶;關(guān)于成長較慢,細(xì)胞比較薄,狀況容易動搖的細(xì)胞類型,一次少傳些,保證每瓶細(xì)胞密度大些,便于安穩(wěn)成長。至于一些比較生疏的細(xì)胞,di一次處理也能夠按照第二種狀況。
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