ELISA試劑盒的操作因固相載體的構(gòu)成不同而有所區(qū)別，國(guó)內(nèi)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)通常均用板式點(diǎn)。   這篇文章將敘說板式ELISA各個(gè)操作過程的留意關(guān)鍵，ELISA檢查試劑盒珠式、管式及磁性球ELSIA，國(guó)外試劑均與特殊儀器合作運(yùn)用。
按試劑盒闡明書的請(qǐng)求預(yù)備實(shí)驗(yàn)中需用的試劑。ELISA頂用的蒸餾 水或去離子水，包含用于洗刷的，應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的。自配的緩沖液運(yùn)用pH計(jì)丈量較正。從冰箱中取出的實(shí)驗(yàn)用試劑應(yīng)待溫度與室溫平衡后運(yùn)用。試劑盒中本次實(shí)驗(yàn)不需用的部分應(yīng)及時(shí)放回冰箱保留。
ELISA試劑盒的制造：對(duì)于每種細(xì)胞因子應(yīng)仔細(xì)閱讀闡明書，留意每批的細(xì)節(jié)。在運(yùn)用細(xì)胞因子前，瞬時(shí)離心試劑瓶，盡可能多地回收其間的細(xì)胞因子。根據(jù)每批闡明書中的細(xì)節(jié)，將凍干的細(xì)胞因子復(fù)溶。 通常待測(cè)抗原規(guī)范曲線的線性規(guī)模的可通過將規(guī)范品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml到15pg/ml。可利用規(guī)范的ELISA操作流程、擴(kuò)大試劑盒、第三類試劑、或改動(dòng)酶底物體系可在必定規(guī)模內(nèi)進(jìn)步靈敏度。為了優(yōu)化靈敏度，建議孵育規(guī)范品和標(biāo)本。若運(yùn)用過氧化物酶作為顯色體系，應(yīng)禁止在洗液和稀釋液中加疊氮鈉，疊氮鈉可抑制過氧化物ELISA試劑盒酶的活性。
可用作ELISA試劑盒測(cè)定的標(biāo)本非常廣泛，體液（如血清 ）、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液、大便）等均可作標(biāo)本以測(cè)定其間某種抗體 或抗原成份。ELISA試劑盒有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測(cè)定（如血清 、尿液），有些則需經(jīng)預(yù)處理（如大便和某些分泌物）。這些標(biāo)本搜集的時(shí)刻、辦法和保留都有必定的請(qǐng)求。